如何克服LC-MS/MS矩阵效应以获得最大可靠性

对抗基质效应的常用方法包括基质匹配校准、向每个样品添加标准和应用内部标准。前两种策略需要额外的样品准备工作或额外的运行，从而产生进一步的成本。重要的是，矩阵匹配校准和标准添加不能完全补偿矩阵效应。内部标准在补偿基质效应方面的有效性取决于校准器的选择。

内部标准可以是化学相关的化合物，如衍生物(例如玉米赤霉烯酮的玉米赤霉烯酮)或在电离过程中具有相同行为的类似化合物，只是在原子质量(稳定同位素)方面有所不同。LC-MS/MS分析依赖于稳定同位素稀释试验，通过向分析样品中添加已知数量的稳定同位素标记标准物来克服基质效应。稳定同位素标记涉及使用非放射性同位素如²H, 13C或15N来取代自然存在的原子。使用氘(²H)取代自然产生的1H，质量翻倍，这就是为什么氘标记的标准品可能显示保留时间变化，导致LC-MS/MS结果不准确的原因。

另一方面，碳自然存在于大多数化合物和真菌毒素中。用13C取代自然产生的12C只会轻微改变原子的总质量，不像氘化标记的标准。添加的13c标记标准，例如13c标记真菌毒素，保留了与其12C类似物相同的特征，在相同的保留时间从分离柱中洗脱。

如图中脱氧雪腐菌醇所示，12C和13C真菌毒素之间的质量差异使得用质谱法进行检测时可以分离和识别两种洗脱形式。

13C峰表示添加标准的已知量。这个峰值可以用来计算未知的分析物量，从而补偿不同的电离效率。通过这种方式，创新的13C标准可以消除矩阵效应。

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