色谱法
如何分析蛋白质?
2021年5月27日
蛋白质由氨基酸组成,是具有复杂分子特征的有机化合物。数百或数千种氨基酸构成每种蛋白质,有机化合物通过肽键将其连接在一起形成链。在过去的几十年中,蛋白质分析的进展使科学家可以深入研究蛋白质的生物信息学结构及其所执行的功能。betway88体育官网下面,我们探讨了蛋白质分析的复杂性及其在加速现代科学中所起的作用。
蛋白质分析的历史
弗雷德里克·桑格(Frederick Sanger),英国生物化学家,诺贝尔化学奖获奖者是蛋白质分析的早期先驱。1949年,他成功地映射了胰岛素的氨基酸序列,证明蛋白质是由线性氨基酸链组成的。
了解蛋白质链
尺寸和功能范围内,蛋白质链可以包含50至2000个氨基酸的任何地方。尽管蛋白质可以含有数百或数千种氨基酸,但只有20种不同类型的有机化合物。氨基酸的独特组合和序列决定了蛋白质的特定功能。一旦结合在一起,氨基酸就会折叠成独特的三维结构。这被称为“天然构象”,并有助于蛋白质执行其专业功能。
betway88体育官网科学家依靠三种主要技术来分析蛋白质:蛋白质分离,蛋白质鉴定和蛋白质印迹。
蛋白质分离
蛋白质分离使用电泳来分离蛋白质并将其悬浮在凝胶基质中。这使观察到电场中的蛋白质迁移率成为可能。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是蛋白质分离的最常见技术,使科学家可以根据大小,溶解度,结合亲和力和电荷分离。betway88体育官网
蛋白质鉴定
蛋白质鉴定使用两种方法之一来分析蛋白质 - 质谱和Edman降解。质谱法涉及测量带电颗粒的质量与充电比,以确定元素组成和化学结构。Edman降解分析技术使用肽来序列氨基酸。
蛋白质印迹
蛋白质印迹技术使用三阶段的过程分离并鉴定单个蛋白质。首先,凝胶电泳用于根据分子量分离大分子。然后将分离的分子转移到膜上,该膜被阻断以阻止抗体结合到表面。接下来,用抗体探测该蛋白质,这些抗体产生信号并允许科学家检测和鉴定特定的蛋白质分子。betway88体育官网
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