高效液相色谱校准工作(第一部分)

为了得到定量结果，必须对高效液相色谱法进行校准。然而，有多种可用的校准类型，每一种都有其优点和局限性。目的是选择最合适的，并且
然后避免无数的小陷阱，因为没有人想要几乎正确的答案!

五种校准类型

1.外部标准校正
这包括分析一系列涵盖感兴趣的浓度范围的标准。例如:
1级- 40mg/l
2级- 70mg/l
3级- 100mg/l
4级- 130mg/l
5级- 160mg/l

对每个组分的峰值进行积分和识别，并将峰值面积与浓度绘制成校准曲线(见下文)。每种成分都应该存在于标准混合物中，因此一系列的校准曲线都是由一组注射产生的，每种成分都有一条曲线。当运行未知样品时，对峰进行积分和识别，峰面积与校准图中的浓度相关。如果校准曲线是一条直线，并且经过零点，则使用单点校准是有效的。例如，只运行最高的标准，并且直线经过这一点和零。如果这些点没有给出一条直线，或者曲线没有经过零点，则应使用多点校准，通常需要五个浓度水平。样品在校准标准后运行，因此建议定期运行已知标准(QC标准)作为未知标准，以检查校准的完整性。外部标准校准工作，前提是注射量没有变化，HPLC条件在运行过程中没有变化。经常有人问，是否可以使用单一标准，注入一系列不同的体积来构建校准。这通常是不可接受的。 It is unusual for the accuracy and precision of the autosampler to be good enough, and since a constant volume of sample will be injected, the system should be calibrated in the same way.