使用微流UHPLC农药的食物样本筛选质/女士

传统农药筛选食物,样品准备使用通用的提取过程,比如QuEChERS(快捷,方便,廉价、有效、崎岖、和安全)[1],然后分析质gc - MS / MS / MS或。通常在质/ MS分析LC流速超过400µL /分钟和结合使用小粒度与高压液相色谱柱,保持锋利的山峰和快速色谱法。这些流量产生优秀的峰形状和结果,但有收回,他们需要更高容量的有机溶剂。高效液相色谱的消耗有机溶剂,如乙腈和甲醇,越来越多的成本分析,及其处理不利的环境影响。因此,减少溶剂消耗在农药残留检测的新方法将有利于环境的同时也降低了运营成本的测试实验室。

这里我们提出新的数据使用Eksigent ekspert™microLC 200系统结合质/ MS方法上开发一个AB SCIEX QTRAP®4500系统和利用将MRM™算法筛选了100 QuEChERS食品中农药提取。方法应用于一个提取辣椒粉,一个矩阵臭名昭著的生产肮脏的提取,显示微流LC足够健壮的处理面临的富有挑战性的样品常规食品检测实验室。

材料和方法
样品制备
对于线性和敏感性测试,校准标准准备在水浓度0.2 - 100的物质含量。辣椒粉和新鲜罗勒提取使用从Supelco QuEChERS方法提供一个工具。香草或香料(5克)与水混合(10毫升)和乙腈(10毫升含有0.05%乙酸)50毫升聚四氟乙烯管。色散SPE (dSPE) MgSO4 QuEChERS盐添加和管动摇(1分钟)和离心机(5分钟,3500 rpm)。顶层(6毫升)是混合了dSPE PSA / C18清理混合物和动摇(1分钟)和离心机(5分钟,3500 rpm)。上层清液(100µL)用水稀释(900µL)和注射(2µL)。

信用证条件Eksigent ekspert™microLC 200系统
LC系统用于这些测试Eksigent ekspert™microLC 200。系统运行40µL /分钟,至少10倍低于传统LC分离使用4.6毫米ID列。2µL注入的分离是使用0.5 x 50毫米光环C18柱举行50ºC和梯度概要表1所示,a = B =甲醇和水,两阶段包含2毫米醋酸铵和0.1%甲酸。

LC UHPLC条件
LC系统用于比较测试是一个日本岛津公司UFLCXR系统组成的两个日本岛津公司LC20AD泵、SIL 20 ac autosampler和CTO20A柱温箱。系统运行在400µL与传统的4.6 x 5.0毫米/分钟Kinetex 2.6µm核心举行50ºC shell高效液相色谱柱直接比较。相同注入体积的2µL和梯度分离(表1)使用相同的移动阶段与微流分析LC。

米/女士条件
在这部作品中,AB SCIEX QTRAP®4500 LC / MS / MS系统是用于积极模式IonSpray电压是5500 V。该方法设置检测125种杀虫剂(250 MRM转换),在一个单一的注入,从列表中包含SCIEX iDQuant™标准装备。数据使用计划收购MRM™算法。高流动注射用日本岛津公司UHPLC,标准电极电喷射和涡轮V™探测器使用源550ºC的温度,气体1 (nebuliser气体)设置50ψ和气体2(加热气体)设置60 psi。微LC时使用,改变了电极微观LC混合电极(50µm ID) [2]。安装微型感应电极的快速和简单的,只需要替换的标准电极,大约一分钟的交流。微电极LC是一种混合PEEKSIL /不锈钢电极,用于低死体积消除峰分散,改善峰的形状。源设置被设置为低流,利用较低的源温度和较低的气体流量设置;然而,MRM设置中使用的一样高流量的方法。这使得容易转移的方法从传统的高流高效液相色谱新Eksigent ekspert™microLC 200系统。

结果与讨论
在这个工作中,所有数据收购和加工使用分析师®软件1.6版本和MultiQuant™软件2.1版本。这项工作的目的是为常规食品LC适用性测试微流测试和比较与传统的敏感性和性能,较高的流动已经建立了农药的分析方法。在这项研究中,色谱法没有优化速度,虽然微流LC方法可以优化减少了运行时间,如果需要年底(简要描述本应用笔记)。比较微流LC与更高的流分析方法,一个2磅的标准被注入。提取离子色谱图比较图2在不同地区的农药洗脱色谱图如图1所示。

这个结果表明微流LC产生相似的峰形状相比,正常流量由于非常低的系统死体积。比较敏感如表2所示,列出10杀虫剂生成运行比较。结果清楚表明增加的反应,它包括一个3折在色谱分离> 10倍增加(信号/噪声值是直接取自MultiQuant™软件)。

确认之间的结转注射非常低,一个100磅的标准被注入(生产饱和反应的杀虫剂),后跟一个水空白(图2)。对于大多数的农药,没有观察到在水里一片空白,结转与移行总体估计< 0.1%。

Flutolanil的线性响应,分析了使用微流LC,如图3所示。曲线清晰地表明,线性的方法保存使用LC微流,这是典型的结果观察其他农药分析。

微流LC的健壮性也被评估。在这些测试中,系统是由反复强调注入过滤稀释QuEChERS提取辣椒粉(总计超过150注射)。保留时间稳定(图4),响应(图5),压力曲线(图6)然后比较系统是否受到大量的原油样品注入的影响。结果显示150注射期间出色的再现性,表明微流LC非常健壮,能够承受长时间的运行分析,包括“脏矩阵”样本。

最后,微流LC的另一个优点是能够缩短运行时间由于低系统的死体积。这方面的一个例子如图7所示的运行时已经从15分钟缩短到不到5分钟。在这个例子中,6µL 1磅的农药标准包含超过200个农药注射30µL /分钟到相同类型光环C18柱用于上述辣椒提取分析。灵敏度非常好,峰高度超过100万cps的杀虫剂。

结论
本研究表明使用微流LC是一个有效的方法在食品中残留分析样本。方法使用Eksigent ekspert™microLC 200系统是快速、敏感、健壮且可再生的,也为实验室提供一个巨大的成本节约。与LC年级乙腈运行成本£100 / L,这3天学习可能成本约£100年公约色谱法(0.6毫升/分钟每天24小时运行)和微流LC不到10£。一年多,这对应于一个储蓄超过£4000 (£90 x 50周)仅在溶剂消耗。此外,由于非常低的死体积微流的LC,运行时可以很容易地减少加速梯度,大大提高吞吐量高容量测试实验室。最后,一个伟大的微流分析LC的好处是提高敏感性,允许更多稀释样品提取和使用低注入量减少基体效应,提高鲁棒性的分析。

引用
1。m . Anastassiades et al。:“快和容易Multiresidue方法采用乙腈提取/分区和“分散固相萃取”产生的农药残留测定的j .采用AOAC公认的Int。86 (2003) 412 - 431
2。k . Mriziq et al。:“更高的灵敏度和分辨率改善微流与小直径UHPLC涡轮V™源电极和硬件使用ExpressHT™超系统”Technical Note Eksigent (2011) # 4590211 - 01