根据列样本集中:个人观点

学术研究人员往往不完全是自己命运的主人。少数能够保持忠于他们的主要利益,为他人利益发展的自然进程和很多发现自己不得不遵循那些愿意资助他们的利益。人发现自己在后者,我的研究兴趣的广泛区域内分离科学及其应用有相当不同的。总是试图期待但偶尔一个人允许自己偶尔一瞥在他的肩上。这样做我很感兴趣,从很久以前出版的一天[1]在某种程度上仍然积累引用。我从来都不是一个严重的药物bioanalyst但资助工作在这一领域有小型信用证允许我继续我的兴趣,当时,特别是微内径LC[2],特别是这种现象称为峰值压缩aka列样本集中(图1)。

简而言之,限制低定量和检测可以通过注入大量的样品溶液的溶剂不强烈比流动相洗脱。这样没有容量超负荷,因此没有一个乐队通常扩大与注入大量有关。纸,评估注入体积限制在使用列聚焦微径柱液相色谱的[1],仍然是引文,解决,正如书名所暗示的,评估的实际程度大量非或弱洗脱样品溶液溶剂可以通过乐队注入不引入效率损失扩大。因此,出版涉及理论的一个重要元素,但实际上这是一个瞬态转移,因为当时我们的兴趣对列的实际应用聚焦。需要在一个领域有一个明显的浓度影响药物生物分析法。因此,对列聚焦在从固相萃取洗脱液的注入墨盒直接到微内径LC含有二氧化硅更暂留烃键列在一个完全自动化的方法测定药物在人类血清[3]。不太明显的作用是高度保留LC固定相,Hypercarb,在促进对列样本集中的手性药物生物分析法[4]。列样本集中持续很感兴趣,但更相关的当前时间,让别人注意到它的价值,是考虑如何继续使用。
这列样本集中的兴趣依然LC并不令人吃惊。毕竟,在薄层色谱法(TLC)、各种常用区域常见,在气相色谱(GC)对列样本集中发生在离注射使用。需要列样本集中也非常的特性减少了体积分离技术,如毛细管电泳(CE)和毛细管电色谱(CEC)。
评估的持续兴趣程度列样本集中在LC通过监测注入体积的评估论文的引文[1]有点伸展,但是,尽管如此,很明显,尽管记录是不均匀连续,丝毫不见减弱(图2),最近一年,2022年,尽管。引用论文的性质(图3)也许是更相关和更明显。鉴于引用论文涉及的理论,有很大一部分基于理论的论文。然而,反映我们的自身利益,论文应用支配生物分析法是很明显的一个领域对列样本集中是必要的。对液体分离技术涉及模式的分布(图3 b),一般信用证文件占主导地位,但也明显需要列样本集中nano-LC和毛细管LC。

论文理论的理解对列聚焦到一个更高水平的复杂性。事实上,正如预计将以下几项研究情况的理论“重量级人物”,原[1]评估注入体积限制已经被取代,甚至“否定”。Groskreutz和韦伯[5],作为一个主要的例子,开发一个匹配的实验数据更精确治疗。此外,他们指出,峰值压缩引起的传入的元素更强烈洗脱溶剂的后边缘移动峰前沿前峰大于预期。另一个理论论文[6]是Desmet,分离科学理论家的老前辈。他的理论是基于实验数据,然后通过实验验证。聚焦在这种情况下被重新调整,一个陷阱前分析柱列接收山峰。被困的山峰被pops的使用溶剂混合物的粘度和nano-LC泵与弹道梯度洗提他们足够陡坡。虽然这设置没有用于实际的应用程序,一个令人印象深刻的增强峰值17.3实现在理想条件和结果符合理论。在最近的理论论文[7],鲁坦et al .,溶剂体积过载的影响梯度LC(这本身就涉及了对列样本集中)进行了研究。 By taking into account effects of sample volume overload and a mismatch between the sample solvent and the initial mobile phase composition for the gradient, it was possible to obtain much more accurate predictions of retention times and peak widths than hitherto had been possible.
正如Desmet的邮报的专栏里重新调整工作[6],一些应用程序的工作涉及实验变异不同于简单的列样本集中的一个LC列。盘等的工作的情况下,[8]可以被认为是一种进步在SPE上钢厂等。[3]在SPE集成,网络和相关后续uHPLC。其他有趣的“变化”包括聚焦在证监会[9]和温度带来的使用集中在毛细管LC [10]。
正如已经指出,生物分析法是一个应用程序区域有一个清晰的列样本集中的兴趣。通常情况下,如发现玛尔塔等。[11]类固醇激素的分析从人血浆蛋白沉淀后,不仅有必要使用高注入量微列上也使用MS-MS检测。就像药品的分析在生物体液,原料药的杂质分析(API)还可以提供一个检测的挑战。2 d-lc可以解决方案的一部分分离大量的结构相关杂质峰从一个另一个更大的主峰。然而,斯托尔所指出的et al。[12], 2 d-lc被认为是一个不如1 d-lc从的角度检测灵敏度。这是很容易弥补通过稀释废水第一列弱溶剂(水)注入之前二维列。这种方法足以允许0.05%的量化w / w杂质当使用紫外检测。使用更多的保留在第二阶段维度也可以被用来带来所需的聚焦效果。黄曲霉毒素等食品,葡萄酒成分和其他环境污染物的痕迹明显的情况下,对列样本集中可能用于提高分析物的检测和量化的低水平。后者区域已被检视[13]。 To give but just one example in the former areas, a very complex method involving isotope dilution, sample preparation on ion-exchange resins, nano-LC and tandem MS was required for the determination of glutathionylated and cysteinylated precursors of 3-mercaptohexan-1-ol and 4-mercapto-4-methylpentan-2-one in white grape juices [14]. Buried in the detail but integral to the success of the method was the use of focussing on a C18 pre-column prior to separation on the C18 nano-LC column.

结论

显然对列的使用集中在LC将继续感兴趣的实践者。这不仅是明显的稳定的引文1997篇文章[1]的实际限制现象也很简单,因为它是难以避免的。当注入方案一个LC系统示例将溶解在流动相或溶剂或多或少地强烈比流动相洗脱。用流动相的溶剂并不总是可能的,要避免使用强溶剂,除非溶解性是一个重要的问题,因此,一个更弱洗脱溶剂可能经常被使用,即使没有特别寻找好处列聚焦。进一步,没有短缺的应用领域定量的界限并不是一个问题,几乎没有什么迹象表明,朝着小型化的趋势和多维LC将减弱。确实如此,随着越来越多的兴趣[15]可持续分离科学,极有可能加速的趋势将继续下去。因此,开发对列聚焦将会继续,无论是否使用列时注入体积限制的评估聚焦微径柱液相色谱的再次引用,被取代,因为它很可能是Groskreutz和韦伯(5)的讨论。

确认

这篇文章是一个个性化,删节版的一篇文章出现在ChromCom,色谱的会员制杂志社会。

引用

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