色谱法
技术提示:改进HIC分析的策略
2022年9月15日
疏水相互作用色谱(HIC)是一种分离模式,通常用于分析抗体-药物偶联物(adc)、单克隆抗体(mAbs)或蛋白质等生物分子。分析物根据其表面疏水性的差异进行分离,类似于反相色谱法。然而,一个很大的优点是,分析物保持了原来的结构和功能,使HIC成为完整蛋白质分析或蛋白质纯化的一个有用的分离模式。
HIC利用可逆的相互作用,发生在分析物和附着在颗粒表面的疏水固定相配体之间,应用逆盐梯度。在梯度开始处的高盐浓度增强了目标分子和固定相之间的疏水相互作用,导致它们的滞留。通过降低盐浓度,相互作用强度减弱,分析物洗脱。
在这个新的技术报告您将了解到以下方面的见解:
- 如何通过提高温度和高初始盐浓度来提高滞留率
- 盐浓度对样品沉淀的影响
- 通过选择合适的pH值来改善疏水相互作用
- 浅的渐变如何提供更高的分辨率
- 有机改性剂对峰形和保留率的影响